پلاسمید Px459

پلاسمید pX459 که با نام پلاسمید pSpCas9(BB)-2A-Puro نیز شناخته می‌شود، امکان انتقال و بیان همزمان کاست بیان‌کننده spCas9 (تحت کنترل پروموتر CMV) و توالی‌های sgRNA (تحت کنترل پروموتور U6) را فراهم می‌سازد.

این پلاسمید واجد توالی کدکننده پورومایسین نیز می‌باشد که با واسطه توالی T2A به توالی spCas متصل بوده و تحت کنترل پروموتر CMV می‌باشد. پس از بیان توالی spCas-puromycin با تجزیه توالی T2A این دو پروتئین از هم جدا شده و spCas9 فعالیت نوکلئازی خود را ایفا می‌کند. این خصوصیت باعث کاهش طول پلاسمید به 9174 جفت باز شده‌است که انتقال پلاسمید به سلول هدف را تسهیل می‌کند.

مارکر GFP پایش ورود پلاسمید به سلول‌های هدف و همچنین جداسازی و تخلیص سلول‌های دریافت‌کننده پلاسمید را امکان پذیر می‌کند.

این پلاسمید واجد مارکر مقاومت به آمپی‌سیلین است و در نتیجه باکتری E.Coli حاوی این پلاسمید را باید در محیط LB Agar حاوی آنتی‌بیوتیک کانامایسین با غلظت 50-100 میکروگرم در هر میلی‌لیتر و در دمای 37 درجه سانتیگراد کشت داد. سویه باکتری مناسب برای این وکتور XL1 Blue است.

شما محققین علاقه‌مند به تحقیقات ویرایش ژنی و ژن‌درمانی در یوکاریوت‌ها، می‌توانید وکتور

pSpCas9(BB)-2A-Puro با کد #62988 را به‌صورت کشت مایع، کلونی روی پلیت آگار و حتی به‌صورت وکتور خطی‌شده از تیم تخصصی ما بخواهید.

علاوه‌بر این شما می توانید طراحی و تولید sgRNAهای مورد نظر خود را نیز به متخصصین شرکت SIMBIOLAB سپرده و وکتور کلون‌شده را در اسرع وقت تحویل بگیرید.